、食品大腸(cháng)菌群快速檢(jiǎn)驗紙片LZ-7原理及适用範圍
将乳糖膽鹽選擇性培養基和TTC顯色劑加載在紙片上,經培養後能夠在紙片上生長並發酵乳糖産酸的即爲大腸菌群陽性,記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。 食品大腸菌群檢驗紙片法與國标法中的九管法相對應,将原來幾步的試驗簡化爲一步,時間由78h縮短爲24h以内,省去瞭制備培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作,随時可以打開包裝進行抽樣檢測。 執行标準:食品安全國家标準 食品微生物檢驗大腸菌群計數MPN計數法(GB/T 4789.3--2010)。
适用於各類食品、飲料等樣品中大腸菌群的快速測定。
2、食品大腸(cháng)菌群快速檢(jiǎn)驗紙片LZ-7操作方法
2.1、樣品處理:按無菌操作稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣瓶或均質杯中,經充分振搖做成1:10的樣品勻液。樣品勻液的pH值應在6.5~7.5之間,必要時用1mol/L*或1mol/L鹽酸調節。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液,注入含有9mL稀釋液的試管内,振搖試管制成1:100的樣品勻液。根據對樣品污染狀況的估計,按上述操作,一次制成10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次,換一支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢,全過程不得超過15min。
2.2、接種
2.2.1、選取兩個稀釋度進行接種,普通食品一般採用1:10和1:100這兩個稀釋度,飲料採用原液和1:10兩個稀釋度。本品每份由三片大紙片(接10mL,袋中二片疊放算作一大片),六片小紙片(接1mL)組成。
2.2.2、用滅菌吸管吸取10mL 1:10樣品勻液加到含有大紙片的塑料袋中(相當於接樣品1g),吸透後平放,做三個重複。再用1mL滅菌吸管吸取1mL同一稀釋度的樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中(相當於接樣品0.1g),做三個重複。再另取一支1mL滅菌吸管吸取1mL 1:100樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中(相當於接樣品0.01g),做三個重複。
2.3、培養:将接種好的紙片(可疊放)放入36℃±1℃培養箱中培養15~24h。
3、食品大腸(cháng)菌群快速檢(jiǎn)驗紙片LZ-7大腸菌群zui可能數(MPN)的報告
3.1 若紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點爲大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫藍色不變或在紫藍色背景上呈現紅色斑點,但周圍沒有黃色均爲大腸菌群陰性紙片。
3.2 記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據《食品飲料大腸菌群MPN表》查出相應的大腸菌群數。
3.3 如接種的*個梯度爲原液,應将表上查出的結果除以10。
4、注意事項
新的國家标準所用的單位改爲每克(或毫升)檢樣中大腸菌群zui可能數,标準的接種量爲0.333g(mL),MPN表也是由此而設計。而使用本品的标準接種量爲3.33g(mL),大紙片接種10mL 1:10樣品勻液相當於1g樣品,因而表内數字應相應降低10倍。飲料樣品的接種量爲33.3mL,大紙片接種10mL樣品原液,表内數字應降低100倍。
5、保存條件
本産品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質期爲一年,鋁箔袋打開後,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月内用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水,在拆封前将整包回溫至室溫。
食品、飲料大腸(cháng)菌群(MPN)檢(jiǎn)索表
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陽性紙片數
|
MPN
|
95%可信限
|
陽性紙片數
|
MPN
|
95%可信限
|
||||||
|
0.10
|
0.01
|
0.001
|
下限
|
上限
|
0.10
|
0.01
|
0.001
|
下限
|
上限
|
||
|
0
0
0
0
|
0
0
1
1
|
0
1
0
1
|
<3.0
3.0
3.0
6.1
|
-
0.15
0.15
1.2
|
9.5
9.6
11
18
|
2
2
2
2
|
2
2
2
3
|
0
1
2
0
|
21
28
35
29
|
4.5
8.7
8.7
8.7
|
42
94
94
94
|
|
0
0
1
1
|
2
3
0
0
|
0
0
0
1
|
6.2
9.4
3.6
7.2
|
1.2
3.6
0.17
1.3
|
18
38
18
18
|
2
3
3
3
|
3
0
0
0
|
1
0
1
2
|
36
23
38
64
|
8.7
4.6
8.7
17
|
94
94
110
180
|
|
1
1
1
1
|
0
1
1
2
|
2
0
1
0
|
11
7.4
11
11
|
3.6
1.3
3.6
3.6
|
38
20
38
42
|
3
3
3
3
|
1
1
1
1
|
0
1
2
3
|
43
75
120
160
|
9
17
37
40
|
180
200
420
420
|
|
1
1
2
2
|
2
3
0
0
|
1
0
0
1
|
15
16
9.2
14
|
4.5
4.5
1.4
3.6
|
42
42
38
42
|
3
3
3
3
|
2
2
2
2
|
0
1
2
3
|
93
150
210
290
|
18
37
40
90
|
420
420
430
1000
|
|
2
2
2
2
|
0
1
1
1
|
2
0
1
2
|
20
15
20
27
|
4.5
3.7
4.5
8.7
|
42
42
42
94
|
3
3
3
3
|
3
3
3
3
|
0
1
2
3
|
240
460
1100
<1100
|
42
90
180
420
|
1000
2000
4100
-
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注1:本表採用3個稀釋度〔0.1g(或0.1ml)、0.01g(或0.01ml)、和0.001g(或0.001ml)〕,每個稀釋度接種3片。
注2:表内所列檢樣量如改用1g(或1ml)、0.1g(或0.1ml)、和0.01g(或0.01ml)時,表内數字應相應降低10倍;如改用0.01g(或0.01ml)、0.001g(或0.001ml)、和0.0001g(或0.0001ml)時,則表内數字應相應增高10倍,其餘類推
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